诺贝尔化学奖在生物学中的应用

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举世瞩目的2014年诺贝尔化学奖揭晓 , 美国和德国科学家艾力克·贝齐格(EricBetzig)、斯特凡·W·赫尔(StefanW.Hell)和威廉姆·E·莫尔纳尔(W.E.Moerner)以其主要贡献——使用荧光分子将光学显微技术带入纳米层次 , 从而突破了自从1873年前为光学显微制定的0.2微米的物理极限 , 获得了这项殊荣 。
本次奖项针对的主要研究之一是EricBetzig和W.E.Moerner的单分子荧光显微技术 。 该技术已经应用于各研究领域 , 在生物学研究中 , 该技术也得到了长足的应用 , 例如:研究神经突触的形成过程 , 各种疾病研究中特定蛋白的聚集和降解过程 , 药物在细胞内的代谢过程等等 。 在这些研究中常用的荧光标记分子有:异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate , FITC),菁类染料(cyaninedyes,Cy2,Cy3,Cy5)等 。
Cloud-CloneCorp.公司在自主制备的普通单克隆抗体和多克隆抗体的基础上研制了多种标记抗体 , 例如:生物素(biotin) , 辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)和异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate , FITC)标记抗体等 。 其中的FITC荧光标记抗体就可以应用于免疫组织化学(ImmunonologicalHistologicalChemistry,IHC) , 细胞免疫荧光(Immunofluorescence) , 小动物活体荧光显微观察等实验中 。
FITC标记抗体在IHC中的应用 , 以FITC标记的人前梯度蛋白2单克隆抗体MAC285Hu81为例 , 其应用于人胃癌组织进行IHC检测 , 荧光显微镜下观察结果如图1所示 。
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图1.MAC285Hu81荧光IHC检测结果
FITC标记抗体在细胞免疫荧光实验中的应用 , 以FITC标记的RAS相关蛋白RAB5A单克隆抗体MAK305Hu81为例 , 该抗体以及细胞核染料4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)应用于小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bonemarrow-derivedmacrophages,BMDM)进行细胞免疫荧光实验 , 显微镜下观察结果展示在图2 , 3中 。
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