「新冠」揭秘|在P3实验室,病毒
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近日 ， 武汉 ， 检测人员在对采集来的样本进行标本信息核对 。 新华社采访人员 程敏摄
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在广东省第二人民医院P3实验室标本处理间内 ， 研究人员正进行开盖加样和核酸提取 。 受访者供图
核酸检测是确诊新冠肺炎的金标准 ， 而检测流程中的每一个环节都是精细活 ， 容不得半点马虎 。
这里是与病毒‘零距离’接触的地方 ， 整个实验室完全密封 ， 室内处于负压状态 ， 我们喜欢用‘三流’来形容它 ， 即人流、物流、气流的单向流动 ， 确保在里面的污染物不会泄漏到外面而造成污染 。 广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国说 。 而他说的这里指的就是P3实验室（生物安全防护三级实验室） 。 广东省第二人民医院每天400多份新冠病毒核酸检测就是在这里开展的 。
现在 ， 让我们揭开广东省第二人民医院P3实验室的神秘面纱 ， 看看在这里病毒究竟是怎样被揪出来的？
检测流程每个环节都是精细活
核酸检测是确诊新冠肺炎的金标准 ， 而检测流程中的每一个环节都是精细活 ， 容不得半点马虎 。
实验室内的检测流程可分为5个步骤：样本进入传递窗—灭活处理—开盖加样和核酸提取—扩增反应判断结果—高压灭菌 。
第一步 ， 采集的检测样本如咽拭子或肛拭子 ， 在进入P3实验室前就得先进入一个特殊的窗口——传递窗 ， 这个窗口也叫Air Lock ， 空气锁 ， 顾名思义 ， 与空气有关 。 这个传递窗有不能同时打开的双重门 ， 保证传递样本时带进去的空气被隔离在双重门中 ， 确保实验室外的环境不受污染 。 这也是三流中物流 ， 样本从这里开启了其在实验室中短暂的一生 。
第二步 ， 样本在水浴箱经半个小时56℃的高温灭活 ， 使病毒蛋白不再有生理活性 ， 失去感染、致病和繁殖能力 ， 使实验员在对样本进行检测时相对安全 ， 但是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响 。
第三步 ， 进行开盖加样和核酸提取 。
第四步 ， 提取的核酸送到核酸检测室内 ， 就要上仪器了 。 提取的核酸加入扩增试剂中 ， 通过荧光PCR仪进行RT-PCR反应 ， 先将提取的核酸逆转录成DNA ， 再以DNA为模版 ， 对特定位点进行扩增 ， 利用不同的温度进行变性、退火和延伸 ， 每个循环采集荧光值 ， 45个循环后绘制荧光曲线 ， 用时约110分钟 ， 实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性 。
第五步 ， 实验过程产生的污物通过高压灭菌后 ， 按相关普通医疗垃圾处理 。 物流在这里就结束了 。
检测结果经历重重比对与复核
任何一个环节出现问题都可能导致检测结果差错 。 因此 ， 为保障检测的质量 ， 检测结果将经历重重的比对与复核 。
据介绍 ， 检测质量的保障措施在检测前就已经开始了 ， 样本采集的医务人员必须经过严格的培训和考核才能上岗 ， 样本的质量与采集的技术密切相关 ， 每个动作流程都必须按规定进行 ， 样本采集完成后的护送工作也需按照严密的程序 ， 由专人专道配送到实验室 。
在检测过程中 ， 实验员始终保持谨慎的态度进行每一次测试 ， 不错过任何一个可疑样本 ， 针对可疑样本 ， 还会选用不同的试剂进行复核确定；其次 ， 按照流程 ， 每进行一批实验 ， 均会随机插入三个以上空白对照 ， 针对阳性样本还会进行病毒基因的测序比对 ， 以防止假阳性的出现 。
检测后 ， 实验室还会定期随机抽取检测样本送到第三方实验室进行检测 ， 对数据进行对比分析 ， 同时实验室也会参加卫生主管部门和广东省临床中心的室间质评 ， 保障检测的准确性 。
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