研之成理|最新Nature Nanotechnology：给细胞器装个电压表背景介绍本文亮点图文解析( 二 )

e、Voltair共定位（CL）的Pearson相关系数（PCC）与d中相应的内吞标记物以及像素位移（PS）。
原位测量绝对溶酶体膜电位
首先，作者验证了VoltairIM在溶酶体中的作用，从电生理学给出了广泛的经验知识。将hk293t细胞中VoltairIM标记溶酶体的G和R通道中的荧光图像转换为G/R图像，从中可以获得G/R分布。考虑到腔为阳性，胞质面为阴性，溶酶体膜电位为+114mv 。这与不同细胞类型的电生理学一致。

本文插图

▲图3 VoltairIM测量溶酶体膜电位。
a、用VoltairIM标记的放大溶酶体的电压钳位示意图。
b、假彩色图像显示在溶酶体内部小叶上标记的VoltairIM的像素G/R比，作为整个溶酶体电压钳位施加的膜电位的函数。
c、VoltairIM灰色迹线，正方形）和VoltairIM（红色迹线，圆圈）的传感器响应作为膜电位（PMP ，质膜电位；IMP ，细胞内膜电位）的函数。插图：VoltairPM（黑色）和VoltairIM（红色）信号在c中从0到100 mV的百分比变化。
d、不同细胞型VoltairIM标记溶酶体的代表性伪彩色G/R图像。
e、在V-ATP酶抑制剂巴菲罗霉素（Baf-A1 ， 500 nM）、mTORC1抑制剂Torin-1（1μM）、TRPML1激活剂ML-SA1（20μM）和Slo1激活剂NS1619（15μM）存在下，测定COS-7、RAW 264.7、BHK-21细胞的溶酶体静息膜电位值（VLy）和HEK 293T值。
f、在VoltairIM标记的溶酶体（红色轨迹）和VoltairIM标记的内体（蓝色轨迹）中， ΔVmem与TRPML1激活时间的时间推移图。
总结：
本文证明了Na+或K+在建立早期内体高膜电位中的作用。再生内膜和质膜表现出相似的电化学特性。先前假设可以忽略不计的跨高尔基体网络的膜电位实际上与溶酶体40的膜电位一样高；然而，它并不是完全由V-ATPase驱动的。通过非侵入性测量细胞器中的膜电位，作者可以测试膜电位是如何调节细胞器功能的。
原文链接：
https://www.nature.com/articles/s41565-020-00784-1

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